鸭肠炎病毒VP22蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

作者：**雄; 李慧昕; 李阳; 邵昱昊; 韩宗玺; 马小军; 刘胜旺; 孔宪刚

来源：中国预防兽医学报, 2009, (09): 721-725.

• 鸭肠炎病毒
• VP22蛋白
• 单克隆抗体 Duck enteritis virus
• VP22 protein
• monoclonal antibodies

为了制备抗鸭肠炎病毒(DEV)VP22蛋白的单克隆抗体(MAb),本研究以DEV Clone-03基因组DNA为模板,通过PCR方法扩增UL49基因并克隆至pMD-18载体。重组质粒经测序鉴定后,将UL49基因亚克隆于原核表达载体pET-30a,构建重组表达质粒pET-30a-UL49。重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)后,经IPTG诱导,在大肠杆菌中获得表达,并对表达的重组蛋白VP22进行western blot鉴定。结果显示,表达的重组蛋白分子量约为36ku,与预期的大小一致。重组蛋白能够被鼠抗DEV阳性血清所识别,表明该重组蛋白具有良好的免疫原性。将重组蛋白纯化、复性后免疫BALB/...

• 单位
  兽医生物技术国家重点实验室; 甘肃农业大学; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所