人血清中福氏2a及宋内志贺菌O-特异性多糖抗体IgG含量间接ELISA定量检测方法的验证及应用

作者：李红; 石刚; 郭丽娜; 陈琼; 付宏斌; 王国东; 胡小华; 朱卫华; 王斌^*; 叶强^*

来源：中国生物制品学杂志, 2023, 36(06): 714-723.

DOI：10.13200/j.cnki.cjb.003915

• 多糖
• 抗体IgG
• 酶联免疫吸附试验
• 志贺菌
• 痢疾疫苗

目的 验证人血清中福氏2a及宋内志贺菌O-特异性多糖(分别简称福氏2a多糖及宋内多糖)抗体IgG含量的ELISA定量检测方法，并用于福氏宋内痢疾双价疫苗免疫前后人血清样本的检测。方法 将参考血清及质控血清按一定比例混合，制备成10份不同浓度的血清样本(编号为S1～S10)，采用企业提供的间接ELISA定量检测方法检测样本，连续测定6 d，计算多糖抗体IgG回收率和变异系数(coefficient of variation,CV)，并以回收率CV低于20%的相应参考血清含量作为定量限(limit of quantitation,LOQ)。采用相同检测方法连续6 d测定血清样本S10及质控血清，每天重复检测3次，计算CV；采用参考血清进行多糖竞争抑制ELISA试验，计算血清对多糖的抑制率。采用企业提供的方法检测参考血清，确定线性范围，获得曲线方程，计算相关系数(R2)。采用验证的方法检测1 842份福氏宋内痢疾双价疫苗免疫前后的人血清样本。结果 10份血清样本中福氏2a和宋内多糖抗体IgG回收率分别为73.21%～222.68%和83.67%～123.56%；试验间及试验内精密性CV均<30%；参考血清对100μg/mL福氏2a和宋内多糖的抑制率分别为85.95%和88.42%；福氏2a和宋内多糖抗体IgG检测的线性范围分别为0.05～0.125和0.025～0.125 EU/mL,R2均≥0.99,LOQ分别为0.050和0.025 EU/mL。福氏宋内痢疾双价疫苗免疫后血清IgG含量大幅高于免疫前。结论 企业提供的ELISA定量检测方法具有良好的准确性、精密性及特异性，可用于痢疾疫苗免疫血清的检测。

• 单位
  中国食品药品检定研究院