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摘要
目的探讨人参皂苷Rg1对阿尔茨海默病(AD)大鼠模型脑片神经元自噬小体相关蛋白表达的影响及其分子机制。方法选取6周龄SD大鼠断头取脑制备海马脑片, 将海马脑片随机分为空白对照组、模型组及低、中、高浓度Rg1组, 每组10张脑片。模型组人工脑脊液中加入Aβ1-42(终浓度5 μmol/L)处理2 h造模, 低、中、高浓度Rg1组加入Aβ1-42(终浓度5 μmol/L)作用2 h造模后分别加入Rg1致终浓度分别为60 μmol/L、120 μmol/L、240 μmol/L作用3 h;空白对照组不给予任何干预药物。干预结束后采用苏木精-伊红(HE)染色观察各组海马脑片病理学改变情况;采用透射电镜检测各组海马脑片自噬小体情况;采用Western blot检测各组脑片自噬相关蛋白P62、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ表达水平以及Aβ1-42和Shank蛋白表达水平。结果 HE染色结果显示, 模型组海马神经元排列紊乱, 存在神经元死亡和缺失, Rg1各组海马神经元排列及缺失情况较模型组改善, 以高浓度Rg1组改善最明显;透射电镜结果显示, 模型组脑片自噬小体较空白对照组明显增多, Rg1各组脑片中自噬小体均较模型组减少。蛋白质印迹结果显示, 与空白对照组比较, 模型组脑片Shank1、P62和LC3-Ⅰ蛋白水平减少(均P<0.05), Aβ1-42、LC3-Ⅱ蛋白水平升高(均P<0.05);与模型组比较, 各Rg1组脑片Shank1、P62和LC3-Ⅰ蛋白表达水平均升高(均P<0.05)、Aβ1-42、LC3-Ⅱ蛋白水平均降低(均P<0.05), 其中以高浓度Rg1组最明显。结论人参皂苷Rg1可能通过上调AD大鼠模型海马脑片Shank1、P62、LC3-Ⅰ蛋白表达, 抑制自噬作用, 发挥大脑神经元的保护作用。
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