科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
目的基于超速离心改良法快速分离提取肺炎克雷伯菌分泌的外膜囊泡并进行鉴定和定量。方法将购于国家卫生健康委员会临床检验中心经典肺炎克雷伯菌(cKP)标准菌株和台湾大学馈赠高毒力肺炎克雷伯菌(hvKP)标准菌株分别置于M9基础培养基中培养9 h, 利用超速离心改良法提取外膜囊泡(OMV), 然后采用负染法于透射电子显微镜下观察其形态和大小, 通过Stewart磷脂分析法进行相对定量, 并采用两独立样本t检验进行两组间比较。结果透射电子显微镜下观察发现, cKP和hvKP分泌OMV的形态大部分呈球形、囊状小泡结构, 小部分形态不规则, OMV直径为20～250 nm, 可见多个囊泡聚集成团, 且hvKP分泌的OMV多于cKP。相对定量检测发现, hvKP分泌的OMV数量多于cKP, 差异有统计学意义(P<0.05)。结论通过超速离心改良法成功实现了肺炎克雷伯菌OMV提取、鉴定及定量检测, 为后续OMV机制及功能研究奠定了基础, 为抗细菌感染治疗提供了新思路。
- 单位
