VEGF121-DFF40融合蛋白原核表达、纯化及体外抗肿瘤活性

作者：张晶; 梁小亮; 黄连江; 袁玉涛; 孙红琰

来源：中国老年学杂志, 2013, (05): 1109-1111.

• VEGF
• DFF40
• 原核表达
• 大肠杆菌
• 纯化
• MTT法
• 抗肿瘤

目的在大肠杆菌中表达VEGF-DFF40基因并纯化融合蛋白,MTT法检测其体外抗肿瘤活性。方法用RT-PCR法扩增目的基因,两基因连接并在PET28a中表达,对产物进行SDS-PAGE电泳及Western印迹分析;体外培养HepG2细胞,HUVEC细胞,用MTT法检测4种浓度VEGF-DFF40融合蛋白及PBS的细胞毒性。结果成功构建了重组表达质粒,并纯化出高纯度的融合蛋白,MTT法融合蛋白对两种细胞的直接作用与PBS组均有显著性差异(P<0.01),提示此融合蛋白对两种细胞均有直接杀伤作用。结论本研究成功获得了高纯度的VEGF121-DFF40融合蛋白,并初步证明其具有免疫学活性,为更进一步...

• 单位
  厦门市第二医院