丁苯酞对神经干细胞向神经细胞分化的促进作用

作者:顾艳玲; 官俏兵; 张晓玲; 韩晨阳*
来源:中国现代应用药学, 2019, 36(10): 1218-1222.
DOI:10.13748/j.cnki.issn1007-7693.2019.10.009

摘要

目的研究丁苯酞通过PI3K-AKT信号通路促进神经干细胞向神经细胞分化的作用。方法分离培养SD大鼠胚胎脑皮质层的神经干细胞,采用分化专用完全培养基培养后,通过光镜下观察和Nestin蛋白免疫荧光法进行鉴定。设置对照组和实验组,其中实验组添加丁苯酞辅助分化,分为丁苯酞低剂量组(1μmol·L-1)、中剂量组(5μmol·L-1)和高剂量组(10μmol·L-1),作用24h后,CCK-8法检测神经干细胞的细胞活力,碱性磷酸酶染色法检测神经干细胞的分化能力,免疫荧光法检测神经细胞分化程度,RT-qPCR法检测转录因子SOX2、PAX6和NeuN的mRNA表达水平,Western-blot及RT-qPCR检测PI3K-AKT信号通路的表达。结果丁苯酞干预后神经干细胞活力提高,分化能力提高,碱性磷酸酶试验呈强阳性,转录因子SOX2、PAX6和NeuN的mRNA表达水平增高,PI3K-AKT信号通路蛋白和mRNA表达水平均增高,且呈现剂量依赖性。结论丁苯酞可以促进神经干细胞向神经细胞分化,其作用机制可能与PI3K-AKT的激活有关。