MARK2基因协同调控HeLa细胞极性与增殖的机制研究

作者：戈应刚; 许舸; 高青; 梁小燕

来源：重庆医科大学学报, 2017, 42(11): 1483-1487.

DOI：10.13406/j.cnki.cyxb.001360

• 细胞周期
• 细胞极性
• MARK2

目的:观察MARK2基因对He La细胞极性与增殖的影响,探讨其可能的机制。方法:脂质体介导MARK2质粒转染He La细胞,G418抗性筛选获得稳定转染的细胞株。TRITC-Phalloidin染色观察细胞极性,平板克隆形成试验研究细胞贴壁生长能力,流式细胞术分析细胞周期各时相细胞的比例,Western blot检测总Rb蛋白及磷酸化Rb蛋白的水平。结果:成功构建稳定转染MARK2的He La细胞系,与空质粒对照组细胞相比,MARK2蛋白表达增强后He La细胞形态改变、上皮细胞极性恢复;MARK2表达增强后He La细胞形成平板克隆数量明显减少[(303.67±7.77)vs.(111.67±7.64),P=0.000],细胞周期G1期比例明显增加[(48.82±0.84)%vs.(72.01±2.13)%,P=0.000]、S期比例减少[(36.60±0.58)%vs.(16.03±3.85)%,P=0.010],Rb蛋白的磷酸化水平明显降低[(7.66±0.74)vs.(1.10±0.13),t=15.053,P=0.003]。结论:在He La细胞中,MARK2通过抑制Rb蛋白的磷酸化,使细胞周期停滞在G1期,抑制细胞增殖。MARK2能够重建He La细胞上皮极性,协同调控细胞极性与细胞增殖两条通路。

• 单位
  重庆医科大学; 生命科学研究院; 重庆医科大学附属第一医院