不同严重程度脓毒症小鼠骨髓中性粒细胞PD-L1的表达及其机制

作者：孙辉; 于垚; 柳益书; 刘璐; 戚欣欣; 黄佳敏; 孙燃; 孙炳伟^*

来源：江苏大学学报(医学版), 2019, 29(01): 1-7.

DOI：10.13312/j.issn.1671-7783.y180237

• 脓毒症
• 中性粒细胞浸润
• 吞噬
• 趋化
• 程序性死亡配体1

目的:观察不同严重程度脓毒症小鼠骨髓中性粒细胞程序性死亡配体1(PD-L1)表达的变化并探讨其初步机制。方法:1.在体实验部分:取30只雄性C57/B6小鼠按随机原则分为假手术组(n=10)、轻症盲肠结扎穿孔组(轻症CLP组,n=10)及重症盲肠结扎穿孔组(重症CLP组,n=10),术后24 h留取肝脏、肺脏组织,进行组织病理学检查;同时检测模型小鼠骨髓中性粒细胞比例及PD-L1表型;另取30只小鼠重复上述分组及实验步骤,术后连续观察72 h,进行生存率分析。2.体外实验部分:取小鼠骨髓中性粒细胞,分为正常对照组、脂多糖(1μg/mL)刺激组进行中性粒细胞趋化功能及吞噬功能检测,另外将中性粒细胞分为对照组、脂多糖组、P38 MAPK抑制剂SB203580(10μmol/L)组、SB 203580(10μmol/L)+脂多糖组,流式细胞术检测各组中性粒细胞PD-L1表型。结果:1.在体实验:轻症CLP组和重症CLP组生存率均显著低于假手术组(P <0. 05和0. 01),肝脏、肺脏炎症病理评分均显著高于假手术组(均P <0. 01),骨髓中性粒细胞比例均显著低于假手术组(均P <0. 01);轻症CLP组中性粒细胞表达PD-L1的比例为(2. 130±0. 37)%,重症CLP组为(4. 587±0. 501 2)%,均显著高于假手术组[(0. 733 3±0. 109 7)%,均P <0. 01]。体外实验:脂多糖组骨髓中性粒细胞的趋化距离显著低于对照组(P <0. 01),而吞噬细菌的细胞阳性率[(16. 310±2. 653 0)%]显著高于对照组[(8. 463±0. 871 5)%,P <0. 01];脂多糖组骨髓中性粒细胞PD-L1阳性表达率为(72. 27±1. 656)%,显著高于对照组[(1. 713±0. 519 6)%,P <0. 01],使用SB 203580后,经过脂多糖刺激,中性粒细胞PD-L1阳性率为(37. 17±1. 38)%,显著低于脂多糖组(P <0. 01)。结论:中性粒细胞向组织器官浸润及其PD-L1表达随脓毒症加重而增加,感染状态下中性粒细胞表面PDL1的表达受P38 MAPK通路调节。

• 单位
  南京医科大学; 江苏大学