摘要
核孔复合物(nuclear pore complex,NPC)是细胞核膜上由多种蛋白组装而成的复杂结构,在细胞核质交换和信息传递中起关键作用。单分子定位超分辨成像技术(SMLM)因其特异性和高成像分辨率成为研究NPC超微结构的主要方法之一。然而,由于抗体标记不完全等因素导致的数据丢失,给后续分析带来困难。本文使用SMLM提供的定位信息,结合基于密度的空间聚类算法(DBSCAN)和层次聚类算法进行数据的提取、分类,建立了NPC筛选和定位的分析流程,能够保留缺失较少且形貌比较均匀的核孔。进一步基于最小二乘法原理对筛选得到的大量NPC进行质心对齐的重构处理,成功复现出其经典八重对称结构,并揭示出核孔蛋白Nup133与Nup98的精确相对位置关系。本研究通过建立核孔的筛选和重构的标准流程,填补了SMLM的数据缺失,并对多种核孔蛋白进行分析,揭示它们的结构特性,为理解核孔的复杂结构提供了一种高通量的定量分析方法。
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