摘要
目的:研究肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)介导SEB-1皮脂细胞凋亡中MG-132的促进机制。方法:将实验SEB-1皮脂细胞随机分为正常组、MG-132组及siRNA+MG-132组。正常组正常培养传代,MG-132组加入蛋白酶体抑制剂MG-132,siRNA+MG-132组在干扰处理TRAIL基因以后加入蛋白酶体抑制剂MG-132。采用MTT法检测细胞凋亡率。分别使用免疫印迹法(Western blotting)及实时荧光定量PCR(qPCR)法对蛋白及基因表达量进行检测。结果:24 h时正常组和MG-132组的细胞数量明显高于12 h,且正常组较高(P<0.05)。12 h至24 h内,siRNA+MG-132组细胞的细胞数量较MG-132组升高幅度更大(P<0.05);随着培养时间的延长,MG-132组细胞的凋亡率逐渐升高,且高于正常组(P<0.05);相比于MG-132组,siRNA+MG-132组培养12 h和24 h后细胞凋亡率则明显降低(P<0.05)。与正常组相比,MG-132组及siRNA+MG-132组细胞Bik、Bid基因表达量明显升高(P<0.05),siRNA+MG-132组的Bik、Bid凋亡基因表达量低于MG-132组(P<0.05);MG-132组及siRNA+MG-132组细胞的Caspase8、TRAIL和Bax蛋白表达量明显升高,Bcl-2蛋白表达量明显降低(P<0.05),siRNA+MG-132组细胞蛋白表达量变化明显低于MG-132组(P<0.05)。结论:蛋白酶体抑制剂MG-132对TRAIL介导的SEB-1皮脂细胞凋亡有促进作用。
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单位鄂州市中心医院