异丙酚通过miR-133a-3p/FTL轴调控GADD45A/JNK通路影响胃癌细胞增殖、迁移及凋亡

作者：韦玲; 杨凯; 刘焕; 程栋^*

来源：川北医学院学报, 2023, 38(08): 1019-1025.

DOI：10.3969/j.issn.1005-3697.2023.08.002

• 异丙酚
• miR-133a-3p
• FTL
• GADD45A/JNK通路
• 胃癌
• 增殖
• 迁移
• 凋亡

目的:探讨异丙酚是否通过miR-133a-3p/FTL轴调控GADD45A/JNK通路影响胃癌细胞的增殖、迁移及凋亡。方法:将胃癌MKN-28细胞系分为磷酸盐缓冲液(PBS)组、异丙酚组、miR-NC组、miR-133a-3p mimics组、anti-miR-NC组、anti-miR-133a-3p组、si-NC组、si-FTL组、异丙酚+anti-miR-NC+si-NC组、PBS+anti-miR-NC+si-NC组、异丙酚+anti-miR-133a-3p+si-NC组、异丙酚+anti-miR-133a-3p+si-FTL组。应用RT-qPCR检测miR-133a-3p和铁蛋白轻链(FTL)mRNA的表达水平；应用MTT法与克隆形成实验测细胞增殖；应用流式细胞术、蛋白质印迹法分别检测细胞凋亡及蛋白表达水平；应用双荧光素酶报告实验检测miR-133a-3p与FTL的靶向关系；应用划痕实验与Transwell侵袭实验检测细胞迁移和侵袭。结果:与PBS组比较，异丙酚组细胞活性、划痕愈合率、细胞克隆形成数、迁移、侵袭细胞数均减少(P<0.05);细胞凋亡率、p53、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、miR-133a-3p、GADD45A及p-JNK蛋白表达水平均升高(P<0.05),FTL表达水平降低(P<0.05)。双荧光素酶实验结果显示，miR-133a-3p靶向调控FTL。敲低FTL或过表达miR-133a-3p后，细胞凋亡率升高，细胞活性、划痕愈合率、细胞克隆形成数、迁移和侵袭细胞数降低；细胞中GADD45A、p-JNK、p53、Bax表达水平升高(P<0.05)。敲低FTL逆转了使用异丙酚及抑制miR-133a-3p表达对GADD45A/JNK信号通路以及MKN-28细胞恶性生物学行为的影响。结论:异丙酚可能通过miR-133a-3p/FTL轴调控GADD45A/JNK通路继而抑制胃癌细胞增殖、迁移，并促进细胞凋亡。

• 单位
  武汉市东西湖区人民医院; 华中科技大学同济医学院附属协和医院