替诺福韦酯抗病毒治疗对慢性乙型肝炎患者病毒特异性CD8+T细胞功能的影响

作者：段树鹏; 朱利红; 侯丽娟; 王宏伟; 宋新文^*; 郝洁

来源：中华肝脏病杂志, 2021, 29(05).

• 慢性乙型肝炎
• 抗病毒
• 免疫应答

目的观察替诺福韦酯(TDF)抗病毒治疗对HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者外周血HBV特异性CD8+T细胞功能的影响, 评估其与HBeAg血清学阴转的相关性。方法纳入2016年10月至2018年7月就诊的HLA-A02限制性HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者63例, 予以TDF(300 mg/d)抗病毒治疗, 分选基线和治疗48周时外周血CD8+T细胞, 流式细胞术检测外周血T细胞计数, 酶联免疫斑点试验检测分泌穿孔素、颗粒酶B和γ干扰素(IFN-γ)的HBV特异性CD8+T细胞频数, 建立HBV特异性CD8+T细胞与HepG2.2.15细胞直接接触和间接接触共培养系统, 检测培养上清液中HBV DNA, 通过检测乳酸脱氢酶水平计算靶细胞死亡率, 酶联免疫吸附试验检测细胞因子表达, 评估病毒特异性CD8+T细胞的细胞杀伤和非细胞杀伤功能。2组计量资料比较采用t检验或配对t检验。结果 TDF治疗48周时病毒学应答率为100%, 生化学应答率为90.48%(57/63), HBeAg阴转率为25.40%(16/63)。外周血T细胞计数在TDF治疗48周时与基线及对照组比较差异均无统计学意义(P > 0.05)。TDF治疗48周时, CHB患者分泌穿孔素、颗粒酶B和IFN-γ的HBV特异性CD8+T细胞频数较基线显著升高(P < 0.001), HBeAg阴转的CHB患者病毒特异性CD8+T细胞分泌穿孔素、颗粒酶B和IFN-γ的频数亦显著高于HBeAg未阴转的患者(P < 0.05)。在直接接触和间接接触培养系统中, TDF治疗48周时HBV特异性CD8+T细胞均可诱导HepG2.2.15细胞培养上清液中HBV DNA显著下降(P < 0.001), 分泌IFN-γ和白细胞介素-2的水平显著升高(P < 0.05), 但仅在直接接触共培养系统中病毒特异性CD8+T细胞诱导HepG2.2.15细胞死亡的比例升高(21.7%±6.18%比16.1%±4.15%, P < 0.001)。HBeAg阴转的CHB患者HBV特异性CD8+T细胞较HBeAg未阴转患者诱导HBV DNA下降水平更显著(P < 0.001)、IFN-γ分泌水平升高(P < 0.05), 但靶细胞死亡比例在HBeAg阴转和未阴转患者之间的差异无统计学意义(P > 0.05)。结论 TDF治疗过程中, 伴随病毒载量下降, 病毒特异性CD8+T细胞的细胞杀伤和非细胞杀伤功能均显著增强, 且与HBeAg阴转密切相关。

• 单位
  新乡医学院第一附属医院