尼古丁对人牙周膜细胞长链非编码RNA NEAT1表达的影响

作者：袁帅; 杜样; 汪璐璐; 周志斐; 吴兴安; 王小竞

来源：医学研究生学报, 2017, 30(03): 240-244.

DOI：10.16571/j.cnki.1008-8199.2017.03.004

• 人牙周膜细胞
• 尼古丁
• NEAT1
• 炎性反应
• 白细胞介素-8

目的多种长链非编码RNA可影响人牙周膜细胞的生理反应,而尼古丁作为吸烟相关性牙周炎的主要危险因素,可引起人牙周膜细胞内多种细胞因子的变化。文中旨在探究尼古丁对人牙周膜细胞(h PDLCs)核内长链非编码RNA NEAT1表达水平和白细胞介素(IL)-8表达水平的影响。方法体外培养h PDLCs,第4代细胞用于后续实验。将细胞随机分为对照组、α-BTX组和尼古丁+α-BTX组。对照组:不加任何刺激的人牙周膜细胞;尼古丁组:10-5mol/L尼古丁刺激细胞4 h;α-BTX组:10-8mol/Lα-BTX刺激细胞;尼古丁+α-BTX组:10-5mol/L尼古丁+10-8mol/Lα-BTX共同刺激。qRT-PCR检测细胞NEAT1及下游IL-8 mRNA表达水平;ELISA检测培养基中IL-8蛋白表达情况。结果牙周膜组织块原代培养3周后可见组织块周围细胞成放射状排列,稳定传代后镜下观察可见h PDLCs呈长梭形或纺锤形,轮廓清晰,贴壁生长。与尼古丁组比较,其余3组h PDLCs NEAT1-1、NEAT1-2和IL-8 mRNA表达均降低(P<0.05)。尼古丁组培养上清中IL-8蛋白表达水平较对照组显著升高,约为对照组的4.8倍[(1226.0±163.0)pg/m L vs(256.4±49.3)pg/m L,P<0.05],而α-BTX组和尼古丁+α-BTX组的IL-8蛋白表达水平较对照组差异无统计学意义(P>0.05)。结论尼古丁可促进h PDLCs NEAT1和IL-8的表达,提示NEAT1可能通过促进早期炎性反应参与吸烟相关性牙周炎的发生发展。

• 单位
  军事口腔医学国家重点实验室; 第四军医大学