基于新型质控线结合系统的时间分辨荧光免疫层析法

作者：程丽莉; 徐部灼; 罗树红; 张卓; 唐浩; 翁一鸣; 黄若磐; 宋旭东^*

来源：生物技术, 2023, 33(04): 429-435.

DOI：10.16519/j.cnki.1004-311x.2023.04.0064

• 新型质控线
• 生物素
• 变异系数
• 时间分辨荧光免疫层析法

[目的]通过新型质控线结合系统、优化结合条件等措施，建立了一种减少血样杂质影响的时间分辨荧光免疫层析方法(Time-resolved fluorescent lateral flow immunochromatographic assay, TRF-LFA)。[方法]通过血样验证常规与新型质控线结合系统的准确度。在新型时间分辨荧光免疫层析试纸条的质控线C区上，包被羊抗生物素抗体，当样品经过结合垫带动时间分辨荧光微球标记的生物素-BSA,与质控线上的羊抗生物素抗体结合，形成稳定的发光复合物。对比常规与新型质控线系统的CV值，验证两者的准确度。[结果]新型质控线结合系统在检测不同稀释倍数的血清、不同抗凝剂处理后的血浆、不同稀释倍数的全血样本时，其组间变异系数(CV值)分别为11.17%、12.52%、9.32%;而常规质控线结合系统的CV值为25.97%、20.09%、21.33%。新型质控线结合系统检测血样的组间变异系数均<15%,而常规方法的组间变异系数均>15%。二者检测结果差异显著。[结论]该测定方法通过不同的样本稀释倍数、不同的样本抗凝剂等验证，新型质控线结合系统的CV值在15%内，其准确度比高于常规方法，能够改良常规时间分辨荧光免疫层析测定中的质控线易受不同样本基质影响导致信号变化较大的问题。