衣原体蛋白酶样活性因子(CPAF)的克隆、表达及纯化

作者：王飞; 朱庆三; 苗旭漫; 胡宁宁; 李霄; 金宁一

来源：中国老年学杂志, 2010, (05): 635-638.

• 衣原体蛋白酶样活性因子(CPAF)
• 表达
• 纯化
• 生物学功能

目的构建含衣原体蛋白酶样活性因子(CPAF)的原核表达载体,经转化E.coli以表达CPAF融合蛋白,研究其生物学功能。方法从病料中克隆得到CPAF的原始基因,将PCR产物经纯化连接到pMD18-T,将重组质粒pMD-CPAF经NdeI和BamHI双酶切,与用相同酶消化的原核表达载体pET42b( )连接,建立pET42b( )-CPAF表达载体,阳性克隆经鉴定后,转化大肠杆菌BL21(DE3)进行表达,经亲和纯化、离子交换纯化、分子筛纯化融合蛋白,进行SDS-PAGE分析,Western印迹检测。结果经酶切鉴定和测序分析证实原核表达质粒构建正确。SDS-PAGE和West-ern印迹结果显示...

• 单位
  吉林大学中日联谊医院; 军事医学科学院军事兽医研究所; 中国人民解放军第二0八医院