小鼠THBS1基因敲除改善内脏脂肪免疫微环境并抑制结直肠癌腹腔种植转移

作者：汪腾; 高源; 赵昆; 向远彩; 缪洪明^*

来源：陆军军医大学学报, 2023, 45(18): 1907-1915.

DOI：10.16016/j.2097-0927.202303119

• 血小板反应蛋白1
• 结直肠癌
• 免疫微环境
• 附睾脂肪

目的 探究血小板反应蛋白1(thrombospondin-1,THBS1)基因敲除对结直肠癌免疫微环境与肿瘤进展的作用。方法 构建THBS1基因敲除小鼠，经PCR、琼脂糖凝胶电泳明确小鼠基因型。用THBS1基因野生型(THBS1+/+)与THBS1基因敲除(THBS1-/-)小鼠构建结直肠癌皮下荷瘤与腹腔种植转移模型，观察THBS1基因敲除对小鼠肿瘤生长情况的影响。用流式细胞术检测腹腔种植转移模型中THBS1基因敲除后对结直肠癌附睾脂肪中免疫细胞的变化。结果 与THBS1+/+小鼠相比，THBS1-/-小鼠在结肠癌皮下荷瘤模型中肿瘤生长没有差异(P>0.05),而在腹腔种植转移模型中则显著抑制肿瘤生长(P<0.05)。流式细胞术检测结果显示，与THBS1+/+小鼠相比，THBS1基因敲除后腹腔种植转移模型小鼠的附睾脂肪组织中总巨噬细胞比例增高(P<0.01),其中M1型(经典型或促炎型)巨噬细胞比例升高(P<0.01)、M2型(替代活化型或抗炎型)巨噬细胞比例下降(P<0.01);髓源性抑制细胞(myeloid-derived suppressor cells, MDSC)比例下降(P<0.05),其中Ly6C亚群(P<0.01)比例升高，Ly6G亚群比例降低(P<0.05);CD8+ T细胞比例显著升高(P<0.01)、CD4+ T细胞比例降低(P<0.01)。与THBS1+/+小鼠相比，THBS1基因敲除小鼠外周血总巨噬细胞、M1型巨噬细胞、M2型巨噬细胞比例均无变化(P>0.05);MDSC及ly6C亚群比例无变化(P>0.05),ly6G亚群比例降低(P<0.05);CD8+ T细胞比例显著降低(P<0.05)、CD4+ T细胞比例无变化(P>0.05)。结论 THBS1基因敲除通过增强肿瘤免疫抑制结直肠癌细胞腹腔种植转移。

• 单位
  中国人民解放军陆军军医大学; 基础医学院; 西南医科大学; 第三军医大学