尼帕病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立

作者：梁洁怡; 郑夔; 袁帅; 戴俊^*; 孙芳芳; 林泽凯; 师永霞; 李小波

来源：中国国境卫生检疫杂志, 2019, 42(01): 9-12.

DOI：10.16408/j.1004-9770.2019.01.003

• 尼帕病毒
• 实时荧光RT-PCR
• 核蛋白

目的建立快速检测尼帕病毒的实时荧光RT-PCR方法。方法分析尼帕病毒N基因片段核苷酸序列的保守性,设计实时荧光RT-PCR引物和探针,优化引物和探针浓度,利用尼帕病毒DNA质粒作为阳性对照,确定最佳反应体系,并进行灵敏性、重复性、特异性检测。结果该方法对尼帕病毒DNA的最适线性检测范围为102108拷贝/μl,检测下限为102拷贝/μl。对2个不同浓度(102、104拷贝/μl)的尼帕病毒DNA进行4次重复检测,具有良好的重复性。与登革病毒、基孔肯雅病毒、黄热病毒、乙脑病毒和汉坦病毒等无交叉反应。结论建立的尼帕病毒实时荧光RT-PCR法能准确、快速地检测尼帕病毒。

• 单位
  广东检验检疫技术中心