hsacirc0005221通过miR-339-5p/STAT5A通路促进前列腺癌进展

作者:陈赛赛; 张煜尉; 王雅丽; 高玥; 王灿; 胡强; 吴天歌; 陶述春; 赵建新*; 陈明*
来源:中华男科学杂志, 2021, 27(04): 301-308.
DOI:10.13263/j.cnki.nja.2021.04.003

摘要

目的:研究hsacirc0005221通过miR-339-5p/STAT5A通路调控前列腺癌的进展的分子机制。方法:核质分离检测hsacirc0005221和miR-339-5p在细胞中的表达定位;Pulldown检测hsacirc0005221结合的miRNA;软件预测结合荧光素酶报告基因确定与hsacirc0005221结合的RNA是miR-339-5p;定量PCR检测hsacirc0005221在前列腺上皮细胞和前列腺癌细胞的表达量;在前列腺癌细胞分别转染hsacirc0005221过表达质粒和siRNA测DU145和LNCaP增殖、侵袭和迁移能力及上皮间质转化(EMT)和凋亡水平;在敲低hsacirc0005221基础上,转染miR-339-5P mimics和inhibitor测DU145和LNCaP增殖、侵袭和迁移能力及EMT标志性蛋白、STAT5A和凋亡水平。结果:hsacirc0005221在前列腺癌细胞的表达水平明显高于前列腺上皮细胞。核质分离实验表明hsacirc0005221、miR-339-5P均主要在胞质中表达。在DU145和LNCaP敲低hsacirc0005221,其增殖、侵袭、迁移及EMT能力明显下降;凋亡水平增加。过表达hsacirc0005221则结果相反。在软件预测排名前5的miRNA中,Pulldown实验结果显示与hsacirc0005221结合的有miR-339-5P、miR-17、miR-520H;敲低或过表达hsacirc0005221,miR-339-5P变化最明显。荧光素酶报告基因结果显示hsacirc0005221与miR-339-5P结合。在DU145和LNCaP敲低hsacirc0005221基础上转染miR-339-5P mimics,其增殖、侵袭和迁移能力明显下降,凋亡水平增加,E-cad水平增加,N-cad水平下降,STAT5A表达水平增加。敲低hsacirc0005221基础上上转染miR-339-5P mimics则结果相反。结论:hsacirc0005221通过miR-339-5p/STAT5A通路促进前列腺癌的进展。

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