摘要
目的 探讨微小RNA-769-3p(miR-769-3p)对卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)感染的神经细胞SH-SY5Y(SK-RG)增殖及迁移方面的作用。方法 将SK-RG细胞分为NC mimics转染组(转染NC mimics)、miRNA-769-3p mimics转染组(转染miRNA-769-3p mimics)、miRNA-6815-5p mimics转染组(转染miRNA-6815-5p mimics)、miRNA-6874-3p mimics转染组(转染miRNA-6874-3p mimics)和miRNA-7974 mimics转染组(转染miRNA-7974 mimics)。用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应和蛋白质印迹法检测哺乳动物西罗莫司靶蛋白(mTOR) mRNA和蛋白的表达水平,用双荧光素酶报告基因实验检测miR-769-3p对mTOR的靶向调控,用噻唑蓝法和平板克隆实验检测细胞的增殖情况,用划痕实验和Transwell实验检测细胞的迁移情况。结果 SK-RG细胞中NC mimics转染组、miRNA-769-3p mimics转染组的mTOR蛋白相对表达水平分别为1.00±0.06和0.60±0.04,细胞第5天的增殖率为4.15±0.14和3.36±0.17,克隆形成数分别为(82.67±3.51)和(53.00±3.61)个,相对迁移率分别为1.00±0.01和0.66±0.01,迁移细胞数分别为(174.30±5.86)和(131.00±5.29)个,miRNA-769-3p mimics转染组的上述指标与NC mimics转染组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 miR-769-3p可能通过靶向抑制mTOR的表达而降低SK-RG细胞的增殖和迁移能力,提示miR-769-3p可能作为治疗KSHV感染的小分子核酸药物。
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单位新疆生产建设兵团第四师医院; 生物化学教研室; 石河子大学