咪达唑仑调节cAMP/PKA/CREB通路对乳腺癌细胞的影响

作者：蒋琦雯^*; 徐杨; 姚军; 叶棋; 任帅帅

来源：中国现代医生, 2023, 61(36): 101-128.

• 咪达唑仑
• 乳腺癌细胞
• cAMP/PKA/CREB通路
• 增殖
• 迁移

目的 探讨咪达唑仑对乳腺癌MDA-MD-231细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其对环磷酸腺苷（cyclicadenosine monophosphate,c AMP）/蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)/cAMP反应元件结合蛋白（cAMP response element binding protein,CREB）信号通路的调节作用。方法 体外培养MDA-MD-231细胞并分为对照组、咪达唑仑L组、咪达唑仑M组、咪达唑仑H组和咪达唑仑H+Sp-cAMPS组，咪达唑仑L组、咪达唑仑M组、咪达唑仑H组分别用5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L咪达唑仑处理细胞，咪达唑仑H+Sp-cAMPS组加入20μmol/L咪达唑仑+10μmol/L Sp-cAMPS处理细胞。3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐[3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide,MTT]法检测细胞的增殖能力；细胞划痕试验检测迁移能力；Transwell试验测定细胞的侵袭能力；流式细胞术检测细胞凋亡；酶联免疫吸附测定（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）检测c AMP的表达水平；蛋白免疫印迹（Western blot）技术验证磷酸化（p-）PKA/PKA、p-CREB/CREB蛋白表达。结果 与对照组比较，咪达唑仑L组、咪达唑仑M组、咪达唑仑H组细胞呈现凋亡现象，凋亡率显著提高，细胞的增殖、迁移和侵袭能力及c AMP、p-PKA/PKA、p-CREB/CREB蛋白表达水平显著下降（P<0.05）；与咪达唑仑H组比较，咪达唑仑H+Sp-cAMPS组细胞生长状态良好，凋亡率显著降低，细胞的增殖、迁移和侵袭能力及cAMP、p-PKA/PKA、p-CREB/CREB蛋白表达水平显著提高（P<0.05）。结论 咪达唑仑可通过抑制cAMP/PKA/CREB信号通路的激活抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭。

• 单位
  上海市第六人民医院; 金华市人民医院