组蛋白乙酰化酶RNAi慢病毒文库构建及其对胆囊癌细胞的感染

作者：杨超; 季福; 沈火剑; 朱宏毅; 李甫; 何敏; 陈涛; 李可为; 王坚; 施维锦

来源：肝胆胰外科杂志, 2012, (03): 224-227.

DOI：10.3969/j.issn.1007-1954.2012.03.015

• 组蛋白乙酰化酶
• 胆囊癌
• RNA干扰(RNAi)
• 短发卡RNA(shRNA)
• 慢病毒载体 histone acetyltransferases(HATs)
• gallbladder carcinoma
• RNA interference(RNAi)
• short hairpin RNA(shRNA)
• lentivirus vectors

目的构建人基因组中16个组蛋白乙酰化酶的短发卡RNA(shRNA)慢病毒载体文库,为进一步研究表观遗传因子对胆囊癌的调控机制提供有利的工具。方法依据shRNA引物设计原则,分别针对每个基因设计4对shRNA引物,将引物退火形成粘性末端后连接至慢病毒载体;经菌落PCR、酶切验证正确后,进行转化及质粒抽提。结果构建了16个组蛋白乙酰化酶基因的shRNA慢病毒载体,共64个shRNA慢病毒载体克隆;并对胆囊癌细胞SGC996和GBC-SD进行了病毒感染的MOI值(multiplicity of infection)摸索,以确保可通过RNAinterference(RNAi)慢病毒干扰的方式对这两株细...

• 单位
  上海交通大学医学院附属仁济医院