肠道病毒71型衣壳蛋白1(VP1)单克隆抗体制备

作者：朱盈霏; 陈雅婧; 李越香; 叶伟; 刘赫; 张慧; 党品香; 王思雨; 吕欣; 雷迎峰; 张芳琳; 姚敏^*

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2022, 38(03): 268-274.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.009352

• 肠道病毒71型(EV71)
• 单克隆抗体(mAb)
• 衣壳蛋白1(VP1)
• 中和活性

目的 制备肠道病毒71型(EV71)衣壳蛋白1(VP1)小鼠源性单克隆抗体(mAb)。方法 表达并纯化VP1蛋白；以灭活并纯化的EV71病毒免疫BALB/c小鼠，通过杂交瘤技术获得抗EV71 VP1的mAb;使用间接ELISA进行抗体效价检测、抗体亚类鉴定，Western blot法检测EV71感染的RD细胞VP1蛋白表达，免疫荧光细胞化学技术检测EV71感染的RD细胞VP1的表达和分布，体外中和试验测定抗体的中和活性。结果 共获得6株可分泌针对EV71 VP1的mAb的杂交瘤细胞株，获得的6株抗体中3株为IgG2a亚型，3株为IgG2b,可用于ELISA、 Western blot法、免疫荧光细胞化学染色，其中2D7具有中和活性，半数抑制剂量(IC50)为9.892μg/mL。结论 获得6株具有较好反应性的mAb,为后续EV71鉴定、诊断和VP1蛋白功能研究等奠定了基础。

• 单位
  中国人民解放军空军军医大学; 西北大学; 基础医学院