禽致病性大肠杆菌噬菌体vB_EcoS_AH50的分离鉴定、生物学特性及全基因组分析

作者:姚澜; 张贝贝; 王芷洋; 郭伟奇; 王帝; 王欣宇; 胡剑刚; 祁晶晶; 田明星; 李海花*; 王少辉*
来源:中国兽医科学, 2022, 52(12): 1568-1577.
DOI:10.16656/j.issn.1673-4696.2022.0207

摘要

为给噬菌体防控禽大肠杆菌病提供参考和依据,以禽致病性大肠杆菌为宿主菌,利用双层琼脂平板法从鸡场粪便样品中分离纯化禽致病性大肠杆菌噬菌体,对其形态、裂解谱、最佳感染复数(MOI)、一步生长曲线、p H和温度稳定性、体外抑菌能力及抑制生物被膜形成能力进行测定,并通过全基因组测序分析其基因组特征。结果显示,分离到1株裂解性禽致病性大肠杆菌噬菌体v B_EcoS_AH50,透射电镜观察显示其属于有尾噬菌体目长尾噬菌体科。v B_EcoS_AH50可特异性裂解O1和O2血清型大肠杆菌;MOI为1;潜伏期和爆发期均为20 min,爆发量约为76 PFU/cell;在4~50℃和pH值在3~11的范围内可保持较强的裂解能力,且在室温下能稳定存活4周。在MOI分别为0.01、0.1和1的条件下,该噬菌体能够有效抑制大肠杆菌生长及形成生物被膜。全基因组测序发现,v B_EcoS_AH50基因组全长为37 268 bp,不含有与毒力因子、毒素、耐药和溶源性相关基因。BLASTn比对显示,该噬菌体全基因组序列与噬菌体PC2最为相近,具有94.56%的一致性和94%的覆盖率。基于噬菌体末端酶大亚基构建的系统发育树显示,v B_EcoS_AH50与噬菌体v B_EcoS_011D5的亲缘关系最近。结果表明,噬菌体v B_EcoS_AH50可特异性裂解大肠杆菌,裂解能力强、耐受性高、安全性好,提示其在防治禽大肠杆菌病方面均有潜在应用价值。

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