金黄色葡萄球菌肠毒素B对LAD2肥大细胞系活化作用的研究

作者：王珊; 赵作涛; 王誉涵; 涂平; 刘玲玲^*

来源：中华皮肤科杂志, 2017, 50(09): 626-630.

DOI：10.3760/cma.j.issn.0412-4030.2017.09.002

• 肥大细胞
• 金黄色葡萄球菌
• 肠毒素类
• 类胰蛋白酶类
• 组胺
• 皮炎, 特应性

目的用LAD2肥大细胞系与金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)共培养, 探讨SEB对肥大细胞非IgE机制的活化作用。方法建立LAD2与不同浓度的SEB(0.01、0.1、1、10、100 μg/ml)以及A23187阳性对照、阴性对照的孵育体系, 培养箱中培养30 min后, 光镜下观察SEB对肥大细胞的细胞形态影响并收集各体系上清液, 通过酶活性法检测肥大细胞分泌的类胰蛋白酶浓度, 并通过ELISA法检测组胺水平。结果 LAD2与SEB共孵育30 min后,光镜下可见肥大细胞形态为细胞略增大、边缘模糊、突起增多, 折光性下降, 呈放射状毛刺样。LAD2与不同浓度SEB(0.01、0.1、1、10、100 μg/ml)共孵育30 min后, 上清液检测类胰蛋白酶浓度分别为(4.116 ± 0.651)、(5.344 ± 0.874)、(3.806 ± 0.459)、(1.309 ± 0.247)、(0.310 ± 0.199)ng/ml, SEB浓度在0.01、0.1、1 μg/ml时, 释放类胰蛋白酶浓度明显高于阴性对照组(P<0.05), 而SEB浓度继续增加则类胰蛋白酶浓度水平依次下降。不同SEB浓度下检测组胺水平分别为(242.409 ± 63.915)、(522.491 ± 73.466)、(550.926 ± 84.466)、(334.397 ± 33.640)、(226.527 ± 5.678)ng/ml, SEB浓度在0.01、0.1、1 μg/ml时, 肥大细胞释放的组胺浓度随SEB浓度的增加而增高, 明显高于阴性对照组(P<0.05);而SEB浓度继续增加时, 肥大细胞释放组胺浓度依次下降。结论 SEB可通过非IgE依赖机制直接作用于肥大细胞, 使肥大细胞活化发生形态变化并释放类胰蛋白酶和组胺。

• 单位
  北京大学第一医院