结核分枝杆菌6 kD早期分泌靶抗原单克隆抗体的制备及其特异性分析

作者：宁唤唤; 任瑞; 康健; 白鹭; 路延之; 谢燕玲; 张芳琳; 柏银兰^*

来源：中国医药导报, 2023, 20(05): 20-23.

DOI：10.20047/j.issn1673-7210.2023.05.04

• 结核分枝杆菌
• 分泌蛋白
• 6 kD早期分泌靶抗原
• 单克隆抗体

目的 制备结核分枝杆菌(Mtb)6 kD早期分泌靶抗原(ESAT-6)单克隆抗体(mAb)并分析其特异性。方法 用亲和层析法纯化目的蛋白ESAT-6，并用该蛋白免疫小鼠。分离免疫小鼠的脾细胞并与骨髓瘤细胞融合，筛选分泌mAb的杂交瘤细胞系。制备腹水并纯化mAb。酶联免疫吸附试验法分析mAb亚类和相对亲和力，蛋白印迹法检测其特异性。结果 制备了可分泌ESAT-6抗体的杂交瘤细胞系，获得了纯化的mAb。mAb亚型为IgG1，相对亲和力为3.9×10-5。该mAb可特异性识别Mtb的ESAT-6。结论 制备抗ESAT-6的mAb为ESAT-6用于结核病诊断与防治制剂及其机制研究奠定了基础。

• 单位
  基础医学院; 生命科学学院; 中国人民解放军空军军医大学; 延安大学