纳米载体SWCNT投递Bcl-2 siRNA促进U251细胞凋亡

作者:胡晓芳; 邱仁杰; 余磊; 刘茂生; 杨琳; 王国保
来源:中国临床解剖学杂志, 2017, 35(05): 521-525.
DOI:10.13418/j.issn.1001-165x.2017.05.009

摘要

目的设计和构建特异性siRNA纳米载体SWCNT-siRNA,通过体外实验,研究其对脑胶质瘤的作用。方法设计合成特异性Bcl-2 siRNA,利用超声技术合成SWCNT-siRNA复合物,动态散射粒度分析仪进行粒径分析;体外培养U251胶质瘤细胞,SWCNT-siRNA复合物处理细胞后,激光共聚焦显微镜追踪siRNA进入细胞的分布。PCR检测靶基因Bcl-2沉默情况,Annexin-V FITC与PI联合标记细胞后,流式细胞仪检测细胞凋亡。结果通过粒径分析证明siRNA成功缠绕到SWCNT上形成稳定的复合物siRNA-SWCNT。利用激光共聚焦显微镜对标记红色荧光的siRNA进行追踪,发现siRNA成功投递到细胞内。PCR验证了被投递到胞浆的siRNA很好的沉默目标基因Bcl-2。通过流式细胞仪分析发现,与对照组比较发现其可以抑制肿瘤细胞生长,促进肿瘤细胞早期凋亡。结论 SWCNT作为纳米载体投递Bcl-2 siRNA进入U251胶质瘤细胞,通过降解Bcl-2 mRNA抑制Bcl-2的表达并促进胶质瘤细胞的凋亡。

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