ROCK抑制剂法舒地尔对BV2小胶质细胞极化的影响

作者：付佩彩; 叶盛; 李志军; 骆翔; 喻志源

来源：卒中与神经疾病, 2021, 28(03): 258-262.

• Rho激酶
• 法舒地尔
• BV2小胶质细胞
• M1
• M2

目的探讨Rho激酶(Rho-associated kinase, ROCK)抑制剂法舒地尔(Fasudil)对BV2小胶质细胞极化的影响。方法免疫荧光观察细胞形态及ROCK2表达水平;乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase, LDH)细胞毒性检测试剂盒检测Fasudil对细胞的毒性作用;逆转录聚合酶链反应(Reverse transcription polymerase chain reaction, RT-PCR)检测小胶质细胞M1[CD86、肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factorα,TNFα)、诱导型一氧化氮合酶(Inducible nitric oxide synthase, iNOS)]和M2[精氨酸酶-1(Arginase 1,Arg-1)、转化生长因子-β(Transforming growth factor-β,TGF-β),CD206]表型标记物的表达水平;酶联免疫吸附测定(Enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)检测细胞上清TNF-α、白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、TGF-β水平。结果免疫荧光显示BV2细胞系表达100%小胶质细胞特异性标记物离子钙结合衔接分子1 (Iba1),且100%表达ROCK2;Fasudil干预后BV2小胶质细胞形态变大、不规则,并伴有细小的枝杈;与对照组比较,Fasudil干预1、3、6和12 h后LDH水平无明显差异(P>0.05);RT-PCR显示,Fasudil干预减少M1型标记物(CD86,TNF-α,iNOS)表达,促进M2型标记物(Arg-1,TGF-β)表达(P<0.01);ELISA检测显示,与Control组比较,脂多糖(Lipopolysaccharide, LPS)+γ干扰素(Interferonγ,IFN-γ)(LPS+IFN-γ)可促进BV2小胶质细胞TNF-α,IL-1β(M1型)分泌,减少TGF-β(M2型)分泌,加入Fasudil干预后TNF-α,IL-1β分泌减少,TGF-β分泌增加(P<0.01)。结论 ROCK抑制剂法舒地尔抑制BV2小胶质细胞向M1型转化,促进其向M2型转化。

• 单位
  神经内科; 华中科技大学同济医学院附属同济医院