大鼠法尼酯X受体慢病毒构建及鉴定

作者:牛永东; 陈理明; 吴曼鹏; 程訸; 张艳美; 黄展勤; 石刚刚
来源:汕头大学医学院学报, 2014, 27(02): 81-83.
DOI:10.13401/j.cnki.jsumc.2014.02.021

摘要

目的:构建大鼠法尼酯X受体(rFXR)慢病毒,为研究FXR在原发性肝细胞癌中的分子机制奠定基础。方法:以pCMX-rFXR(NM021745.1)为模板,将rFXR克隆到pWPXL表达载体中,酶切及DNA测序鉴定后转染HEK293T细胞,包装重组慢病毒rFXR sh-RNA。Western blot鉴定后,感染Huh7细胞进行功能检测。结果:证实pWPXL-rFXR sh-RNA构建及病毒包装成功;感染Huh7后,rFXR表达明显提高:FXR靶基因SHP和BSEP的表达增加。结论:pWPXL-rFXR sh-RNA慢病毒构建及包装成功,为研究FXR的生物学功能奠定基础。

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