摘要

目的 探讨鱼藤素对小鼠神经母细胞瘤细胞恶性生物学行为的作用及机制。方法 取处于对数生长期的Neuro-2A细胞,用不同浓度(0、0.01、0.1、1、10、100、1 000 nmol·L-1)的鱼藤素作用48 h,用MTT法检测细胞存活率,选择鱼藤素对Neuro-2A细胞的半数抑制浓度(IC50)进行后续实验。将细胞随机分为对照组、鱼藤素组、LPS组和鱼藤素+LPS组,用MTT法检测细胞的相对活力,用流式细胞术检测细胞凋亡率,用RT-PCR检测Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)、核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)mRNA的表达水平,用Western blot检测细胞增殖核抗原67(antigen identified by monoclonal antibody 67,Ki67)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(cleaved-caspase3)和TLR4/NF-κB通路相关蛋白的表达水平。结果 用不同浓度的鱼藤素处理Neuro-2A细胞后,细胞存活率呈浓度依赖性降低。与对照组比较,鱼藤素组细胞的相对活力降低,凋亡率升高,TLR4 mRNA的相对表达量降低,cleaved-caspase3蛋白的相对表达量升高,Ki67、TLR4和p-p65蛋白的相对表达量降低(P<0.05),LPS组细胞的相对活力提高,凋亡率降低,TLR4 mRNA的相对表达量升高,cleaved-caspase3蛋白的相对表达量降低,Ki67、TLR4和p-p65蛋白的相对表达量升高(P<0.05);与鱼藤素组比较,鱼藤素+LPS组细胞的相对活力升高,凋亡率降低,TLR4 mRNA的相对表达量升高,cleaved-caspase3蛋白的相对表达量降低,Ki67、TLR4和p-p65蛋白的相对表达量升高(P<0.05);与LPS组比较,鱼藤素+LPS组细胞的相对活力降低,凋亡率升高,TLR4 mRNA的相对表达量降低,cleaved-caspase3蛋白的相对表达量升高,Ki67、TLR4和p-p65蛋白的相对表达量降低(P<0.05)。结论 鱼藤素可以抑制小鼠神经母细胞瘤细胞增殖,诱导细胞凋亡,其作用可能通过抑制TLR4/NF-κB通路,调控细胞增殖、凋亡相关蛋白的表达实现。

  • 单位
    河南省人民医院; 河南科技大学第一附属医院