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摘要
本发明公开了一种能抗杂菌污染和噬菌体侵染的加强型大肠杆菌及其构建方法与应用。该方法包括如下步骤：以大肠杆菌BL21(DE3)为宿主,将甲酰胺酶基因、亚磷酸脱氢酶基因扩增成融合基因,和抵抗噬菌体的CRISPR/Cas9质粒转化入大肠杆菌,得到所述重组大肠杆菌。该重组大肠杆菌能表达甲酰胺酶与亚磷酸脱氢酶融合蛋白,能同时分解甲酰胺和氧化亚磷酸盐,为重组大肠杆菌提供所需的氮源和磷源；而其他微生物因缺乏代谢甲酰胺和亚磷酸盐的酶,无法在含甲酰胺和亚磷酸盐的MOPS培养基中生长繁殖,这可以解决大肠杆菌在工业发酵中染菌问题。其次,重组大肠杆菌能利用CRISPR/Cas9系统剪切噬菌体基因组,防止噬菌体的侵染。
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