细胞表面荧光免疫吸附法在猪流行性腹泻病毒N蛋白单克隆抗体杂交瘤筛选中的应用

作者：罗素贤; 陈君; 郭楠楠; 宋德平; 吴琼; 丁珍; 黄冬艳; 甘平; 叶昱^*; 唐玉新^*

来源：中国预防兽医学报, 2020, 42(03): 274-279.

• PEDV
• 细胞表面免疫荧光
• 筛选
• 单克隆抗体
• 杂交瘤

为验证细胞表面荧光免疫吸附法(CSFIA)筛选高活性杂交瘤细胞的效果,本研究以原核表达的猪流行性腹泻病毒(PEDV)重组N蛋白为免疫原,免疫6周龄～8周龄的BALB/c雌性小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合,分别采用CSFIA和间接ELISA方法筛选杂交瘤细胞,并检测目的杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体(MAb)效价。结果显示,CSFIA筛选的MAb 1B1比间接ELISA筛选的MAb 3D3抗体效价高10倍,并且通过观察荧光强度能够实现杂交瘤细胞的一次性筛选,无需多次亚克隆,周期缩短约30 d。本研究表明CSFIA在筛选杂交瘤细胞中具有简单、直观和高效的优点,是一种值得推广的快速制备MAb的新方法。

• 单位
  江西省动物疫病预防控制中心; 江西农业大学