薯蓣皂苷通过调控PI3K/AKT信号通路抑制人肺腺癌细胞H1299上皮间质转化

作者：茆文莉; 周芷晴; 王小兰; 杜海燕; 杜标炎; 赵婷秀; 何彦丽^*

来源：中药新药与临床药理, 2019, 30(01): 39-46.

DOI：10.19378/j.issn.1003-9783.2019.01.007

• 薯蓣皂苷
• 人肺腺癌细胞H1299
• 上皮间质转化
• 细胞增殖
• 细胞迁移
• 细胞侵袭
• PI3K/AKT信号通路

目的研究薯蓣皂苷(Dioscin,Dio)对人肺腺癌细胞H1299上皮间质转化的影响,并初步探讨其作用机制。方法采用不同浓度Dio(1、2、4、8μmol·L-1)处理H1299细胞24、48 h,CCK8法检测细胞的增殖能力。选择低于IC50浓度的Dio(1、2μmol·L-1)作用于H1299细胞,采用细胞划痕实验和Transwell穿膜实验观察不同浓度Dio对H1299细胞迁移能力的影响;采用铺有Matrigel胶的Transwell实验检测Dio对H1299细胞侵袭能力的影响;Western Blot法检测Dio对H1299细胞中E-cadherin、Zonula occluden 1(ZO-1)、ZEB1、Cludin-1、N-cadherin、Vimentin、β-catenin、PI3K、AKT、P-AKT蛋白表达的影响;免疫荧光法检测间质标志物Vimentin在细胞中的定位及表达情况。结果 Dio干预24、48 h后的IC50值分别为3.50、3.21μmol·L-1,且呈现浓度依赖性。Dio干预后与空白对照组比较,Dio 1、2μmol·L-1浓度组的细胞愈合率显著降低(P<0.05,P<0.001);Dio 1、2μmol·L-1浓度组均能显著抑制H1299细胞的迁移能力(P <0.001),并显著抑制H1299细胞体外侵袭能力(P <0.001);Dio 1、2μmol·L-1浓度组能明显上调E-cadherin、ZO-1和Cludin-1蛋白的表达(P <0.05,P <0.01,P <0.001),下调N-cadherin、Vimentin、ZEB1、β-catenin蛋白及PI3K/AKT信号通路蛋白PI3K、AKT、P-AKT的表达(P <0.05,P <0.01,P <0.001);Dio 1、2μmol·L-1浓度组免疫荧光定位表达结果显示Vimentin表达明显降低。结论 Dio能有效抑制人肺腺癌H1299细胞增殖,低于IC50浓度的Dio(1、2μmol·L-1)能明显抑制H1299细胞的迁移与侵袭能力,可能与通过调控PI3K/AKT信号通路有关。

• 单位
  广州中医药大学; 基础医学院