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摘要
目的:探讨慢病毒介导的RNA干扰敲减泛素特异性肽酶39(ubiquitin specific peptidase 39,USP39)对人膀胱癌细胞生长和细胞凋亡的影响,为膀胱癌的治疗提供新思路。方法:RT-qPCR确定5637和T24细胞系中USP39 mRNA的表达;设计合成针对USP39的特异性shRNA,利用脂质体转染膀胱癌细胞后,RT-qPCR和Western blotting检测shRNA抑制效率;通过Celigo细胞计数测定、MTT法和集落形成能力检测细胞的增殖能力和集落形成能力;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blotting检测凋亡标记物C-PARP1、p53、p-p53和C-Caspase-3的表达。结果:通过RT-qPCR和Western blotting分析确定,shRNA敲减后细胞中USP39的mRNA和蛋白质表达水平显著降低。通过MTT分析、集落形成分析和流式细胞术分析证实,USP39的敲减显著降低了膀胱癌细胞的增殖和集落形成能力,并诱导了细胞凋亡。此外,Western blotting分析表明,USP39基因敲减可能通过上调膀胱癌5637细胞中p53、p-p53、C-PARP1和C-Caspase-3的表达诱导细胞凋亡。结论:敲减USP39可通过激活Caspase级联反应和上调p53的表达来抑制膀胱癌细胞的增殖。这些数据可为开发USP39作为抗膀胱癌的潜在分子靶标提供实验依据。USP39可能是针对膀胱癌靶向治疗的新型生物标志物,需要进一步研究。
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