穿心莲内酯对新型冠状病毒奥密克戎毒株的体外抑制作用研究

作者：张梦云; 丁晓娟; 肖静静; 伍伟; 胡杨波; 唐薇; 张宏雁; 张勇

来源：中药药理与临床, 2023, 39(12): 58-63.

DOI：10.13412/j.cnki.zyyl.20230712.004

• 穿心莲内酯
• 新型冠状病毒肺炎
• 新型冠状病毒
• 奥密克戎
• 抗病毒

目的:研究穿心莲内酯体外对新型冠状病毒（Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus 2,SARS-CoV-2）奥密克戎毒株（Omicron B.1.1.529）的抑制作用。方法:1)采用非洲绿猴肾细胞系（Vero-E6）细胞培养新型冠状病毒奥密克戎毒株，制备穿心莲内酯、瑞德西韦（Remdesivir）共孵育。2)观察细胞病变效应（Cytopathic effect, CPE）并采用Cell Titer-Glo化学发光细胞活性检测试剂盒检测细胞活力（Cell viability）;qRT-PCR定量检测并计算病毒拷贝数。参考公式计算细胞活性和抑制率，Graphpad Prism 8作图并计算半数细胞毒性浓度(Concentration of cytotoxicity 50%,CC50)和半最大效应浓度(Concentration for 50%of maximal effect, EC50)。3)通过药物作用时间过程分析（Time-of-addition assay）试验观察药物作用阶段。结果:1)穿心莲内酯在200μmol/L,瑞德西韦在100μmol/L时对Vero E6细胞有一定毒性，穿心莲内酯CC50约为175.1μmol/L;瑞德西韦CC50约为132.4μmol/L。2) CPE法计算穿心莲内酯EC50约为2.94μmol/L,瑞德西韦EC50约为1.27μmol/L,二者均对SARS-CoV-2有一定抑制作用；qRT-PCR法验证穿心莲内酯EC50约为9.52μmol/L;瑞德西韦EC50约为1.47μmol/L。3)药物对病毒抑制率：正常对照组（100.0±0）%;模型对照组（-2.3±27.5）%;穿心莲内酯预处理组（33.9±13.7）%;穿心莲内酯共处理组（72.4±5.6）%;穿心莲内酯后处理组（98.9±0.6）%;瑞德西韦后处理组（99.0±0.3）%;与正常对照组比较，模型对照组抑制率显著降低（P<0.01）;与模型对照组比较，穿心莲内酯预处理组、共处理组、后处理组以及瑞德西韦后处理组抑制率均显著升高（P<0.01）;穿心莲内酯预处理组抑制率显著低于共处理组、后处理组以及瑞德西韦后处理组（P<0.01）,穿心莲内酯共处理组抑制率明显低于穿心莲内酯后处理组、瑞德西韦后处理组（P<0.05）。结论:穿心莲内酯在体外细胞实验中对新型冠状病毒奥密克戎毒株具有较强抑制作用，且细胞毒性较低。穿心莲内酯在病毒吸附、进入细胞阶段均对病毒有抑制作用，尤其在病毒进入细胞后的复制阶段表现出较强的抑制作用，效果与瑞德西韦相当。

• 单位
  武汉科技大学; 中国科学院武汉病毒研究所