非激动剂PPARγ配体的筛选方法建立和应用

作者：环奕; 彭军; 王悦; 贾春明; **; **华; 冯志强; 申竹芳

来源：药学学报, 2014, 49(12): 1658-1664.

DOI：10.16438/j.0513-4870.2014.12.014

• 过氧化物酶体增殖物激活受体γ
• 激动剂
• 配体
• 转录激活
• 结合活性
• 亲和力

建立体外活性评价方法考察化合物对过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ)转录激活活性和结合活性。首先通过质粒构建,分别建立PPARγ反应原件(PPARγresponse element,PPRE)介导报告基因表达的转录激活筛选方法以及PPARγ配体结合区(ligand binding domain,LBD)与酵母转录激活因子Gal4组成的嵌合受体在细胞水平的结合活性筛选方法。并采用基于时间分辨-荧光共振能量转移(time resolved-fluorescence resonance energy transfer,TR-FRET)技术的PPARγ竞争性结合检测方法,考察化合物或药物对PPARγ的亲和力。采用以上3种不同的体外活性评价方法,评价不同PPARγ配体的效能和作用特点,并发现了一个新的苯磺酰胺衍生化合物,ZLJ01,具有类似于已知PPARγ激动剂的结合活性及亲和力,但无PPRE介导的转录激活活性。初步体外降糖活性检测发现,ZLJ01可促进肝细胞胰岛素依赖的葡萄糖摄取。综上所述,结合转录激活活性和亲和力的评价方法,可用于筛选非激动剂PPARγ配体,以发现新型PPARγ调节剂。

• 单位
  天然药物活性物质与功能国家重点实验室; 北京协和医学院; 中国医学科学院; 药物研究所