摘要
目的构建一种能稳定表达人水通道蛋白-9(AQP9)的真核细胞载体,并检测视神经脊髓炎(NMO)患者血清中的AQP9抗体。方法将人AQP9基因克隆入pc DNA3.1+质粒中构建AQP9-pc DNA3.1+载体,并转染HEK-293T细胞中。AQP9蛋白的表达通过RT-PCR和Western blot法验证。通过间接免疫荧光法检测NMO患者血清中的AQP9抗体。结果 AQP9的mRNA相对表达量明显高于空载体,且蛋白表达量在32 k D条带附近明显高于空载和293T细胞。在4例NMO患者血清中均检测到AQP9抗体,1例脑梗死和1例健康人中抗体均为阴性。结论这种转染表达AQP9的细胞模式相对简捷,可用来检测NMO患者中的AQP9抗体,对NMO研究有一定意义。
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单位神经内科; 广州医科大学附属第二医院