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摘要
目的 在大肠埃希菌中表达人诺如病毒(norovirus,NoV)NS6非结构蛋白,为了获得高纯度且具有酶活性的人诺如病毒NS6蛋白。方法 将NoV NS6蛋白基因克隆至原核表达载体pDE1中,转化至E.coli BL21感受态细胞中进行表达,产物经亲和及分子筛层析纯化。NS6蛋白在37 ℃条件下,酶切融合蛋白15VP1-6P,检测其酶切活性。结果 NS6蛋白在大肠埃希菌中获得了稳定、高效表达,纯化后纯度可达95%以上。NS6蛋白能够切割含3C酶切位点的融合蛋白。结论 在大肠埃希菌中成功表达了具有酶切活性的NoV非结构蛋白NS6,为进一步研究NoV的致病机制奠定了基础。
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单位内蒙古医科大学; 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所; 基础医学院
