摘要
建立了一种全血、多参数的流式检测技术用以分析人类外周血调节性B细胞(regulator B cells,Breg)相关分子标志物,即CD19+TGF-β+、CD19+IL-10+、CD19+CD25+,比较不同刺激条件CpG+PIB及LPS+PIB对检测结果的影响,并探讨Breg细胞与实体肿瘤的相关性.实验结果显示,人全血经5~6 h刺激因子刺激后能够有效地检测到Breg细胞,且两种检测条件均能够获得较好的检测效果,其中CpG+PIB刺激条件有更高的检测效率.应用该检测方法分别检测健康人20例及肿瘤患者60例,结果提示肿瘤患者CD19+IL-10+细胞比例(1.05±0.78)%与健康人(0.45±0.23)%相比显著升高(P=0.001);而肿瘤患者CD19+TGF-β+细胞比例(0.96±0.87)%与健康人(0.91±0.40)%相比没有显著差异(P=0.764),肿瘤患者CD19+CD25+细胞比例(18.16±10.57)%与健康人(18.83±6.22)%相比没有显著差异(P=0.729),但Ⅳ期肿瘤CD19+TGF-β+细胞比例(1.23±1.16)%以及CD19+CD25+细胞比例(23.41±11.70)%均高于健康组.该方法的建立为探讨Breg细胞与疾病免疫状态的相关性提供了一种可行的研究方法.
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