体外培养人视网膜微血管内皮细胞屏障功能的研究

作者:李建桥; 江静波; 罗燕; 刘清云; 肖伟; 史煜; 马红婕; 唐仕波
来源:中国病理生理杂志, 2009, 25(04): 749-754.
DOI:10.3321/j.issn:1000-4718.2009.04.025

摘要

目的:研究原代培养的人视网膜微血管内皮细胞屏障功能。方法:对人视网膜微血管内皮细胞进行原代培养并鉴定,第4代细胞接种于Polyester(PET)膜上,不同时点对滤膜表面行显微镜观察,通过紧密连接相关蛋白occludin的表达,间接反映细胞之间紧密连接的形成,应用共聚焦免疫显微镜观察2、3、4周occludin表达的变化;跨膜电阻(TER)检测屏障的稳定性,并通过测量正常培养条件和5μg/L的血管内皮生长因子(VEGF)干预下辣根过氧化物酶(HRP)通透性的改变反映屏障特性。结果:成功培养了人视网膜微血管内皮细胞,纯度可达95.8%。细胞接种1周后融合为单层,接种后2、3、4周细胞密度无明显变...

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