绵羊粪便中植物基因组DNA的提取及其PCR检测

作者：郭艳萍; 张英俊; 陈文青; 张浩

来源：中国畜牧杂志, 2016, 52(23): 78-83.

• 绵羊
• 粪便DNA
• 植物基因
• PCR扩增
• 特异性引物

本试验采集了16只圈养绵羊的新鲜粪便,利用试剂盒法(酚-氯仿法)对粪便基因组DNA进行了提取。电泳检测结果表明:从绵羊粪便中获得的DNA纯度较高,完整性好。以提取的基因组DNA为模板,利用文献报道的2对通用引物(r D5-ITS2/rb1-ITS2和rbc LZ1/rbc L19b)以及自行设计的羊草ITS特异性引物(ITS-LC)、碱茅ITS特异性引物(ITS-PD)和芦苇rbc L特异性引物(rbc L-PA)进行PCR扩增。琼脂糖凝胶电泳分析结果表明,5对引物均能获得成功扩增,并得到目的条带。进一步对羊草、碱茅和芦苇进行序列测定,并将测序结果通过Gen Bank数据库进行Blast比对。结果表明:DNA相似性分别为95%、94%和98%,可以证明扩增产物分别属于羊草、碱茅和芦苇的某个片段。

• 单位
  甘肃农业大学; 动物科技学院; 中国农业大学; 西北农林科技大学