外泌体源性微小核糖核酸在慢性乙型肝炎患者自然史不同阶段中的表达及研究

作者：王倩倩; 卢川; 黄晨璐; 黄玉仙; 陈良^*

来源：中华传染病杂志, 2018, 36(07): 405-410.

• 肝炎,乙型,慢性
• 微RNA
• 血清外泌体

目的探讨CHB患者自然史不同阶段的血清外泌体中差异表达的miRNA及其临床意义。方法 2014年1月至2017年1月上海市(复旦大学附属)公共卫生临床中心CHB初治患者92例,其中免疫耐受期24例,免疫清除期24例,低复制期24例,再活动期20例。采用ExoQuick试剂盒抽提250μL血清中的外泌体,通过蛋白免疫印迹法检测外泌体蛋白标志物LAMP2和TSG101的表达;实时荧光定量PCR技术检测miRNA-122、miRNA-125a、miRNA-29c、miRNA-200c在血清外泌体中的表达。组间差异比较采用Mann-WhitneyU检验和Kruskal-Wallis H检验;关联性分析采用皮尔逊相关系数;用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic, ROC曲线)来评估预测效能。结果蛋白质免疫印迹法检测外泌体表面特异性标志物LAMP2和TSG101阳性。CHB患者血清外泌体中的miRNA-122(H=41. 06)、miRNA-125a(H=29. 31)、miRNA-29c (H=49. 14)和miRNA-200c(H=31.73)在自然史不同阶段表达差异均有统计学意义(均P<0.01)。根据肝功能指标及肝穿刺结果 ,与无炎症组相比,炎症组血清外泌体的miRNA-122(U=804)、miRNA-29c(U=317)和miRNA-200c(U=574)均下调(均P<0. 05),而miRNA-125a上调(U=279,P<0. 01)。miRNA-200c与ALT呈负相关(r=-0.393 2,P<0.01),而miRNA-125a与ALT呈正相关(r=0.598 1,P<0. 01)。通过ROC曲线来评价外泌体源miRNA-122、miRNA-125a、miRNA-29c和miRNA-200c对炎症的诊断价值,曲线下面积分别为0.619 3、0.839 6、0.824 3和0.688 3,其中miRNA-125a曲线下面积最大,敏感度为84.62%,特异度为74. 47%。而ALT区分肝穿刺有无炎性反应的ROC曲线下面积为0.795 3,敏感度为81. 08%,特异度为70.97%。结论外泌体源性miRNA在CHB患者自然史不同阶段中的表达存在明显差异,与炎性反应相关的外泌体源miRNA有望成为诊断肝脏炎性反应的新型无创生物学标志物,帮助确定CHB患者临床用药治疗的最佳时机。

• 单位
  复旦大学