柽柳类锌指基因ThZFL酵母诱饵表达载体的构建及其表达验证

作者：郑唐春; 王英; 臧丽娜; 王亚军; 曲冠证; 夏德安

来源：东北林业大学学报, 2011, (12): 4-7+15.

DOI：10.13759/j.cnki.dlxb.2011.12.001

• 柽柳
• ThZFL基因
• 酵母诱饵表达载体
• 自激活作用 Tamarix hispida
• ThZFL gene
• Yeast bait expression vector
• Autoactivation

利用PCR技术从柽柳cDNA文库中克隆出ThZFL目的基因序列,连接到pMD18-T载体,转化大肠杆菌DH5α感受态,经检验后提取质粒,用BamH I和EcoR I限制性内切酶双酶切pMD18-T-ThZFL载体和pG-BKT7-BD空载体,并将酶切产物胶回收后,用T4 DNA连接酶连接过夜后转化大肠杆菌DH5α感受态获得目的基因转化子pGBKT7-ThZFL,对转化子进行质粒PCR检验、质粒酶切检验、DNA测序鉴定。将测序检验正确的pG-BKT7-ThZFL转化子,转化酵母Y2Hgold菌株,对转化后的酵母涂布SD/-Trp、SD/-Trp/X、DDO、TDO平板,验证目的基因的自激活作用,...

• 单位
  东北林业大学; 林木遗传育种国家重点实验室