高亲和PDGFβR多肽修饰的截短型TβRⅡ的可溶性表达条件优化

作者：王兵; 刘海峰; 候惠娴; 王春涛^*

来源：牡丹江医学院学报, 2023, 44(02): 25-28.

DOI：10.13799/j.cnki.mdjyxyxb.2023.02.032

• 转化生长因子βⅡ型受体
• 异丙基-β-D-硫代半乳糖苷
• 可溶性表达
• 条件优化

目的 探讨高亲和血小板衍生生长因子受体(Platelet derived growth factor-β receptor, PDGFβR)多肽ZPDGFβR修饰的截短型转化生长因子β Ⅱ型受体(Truncated transforming growth factor-β receptor type Ⅱ,tTβRⅡ)的重组蛋白(Z-tTβRⅡ)最佳可溶性表达的条件。方法 将含有原核表达质粒pET28/Z-tTβRⅡ的阳性大肠杆菌(Rossta/pET28-Z-tTβRⅡ)置于LB培养基中培养，接着加入不同浓度的IPTG,使其终浓度为0.2、0.4、0.6、0.8 mmo/L,应用SDS-PAGE技术分析在不同温度时间下(16℃、18 h, 20℃、20 h和37℃、6 h)重组蛋白Z-tTβRⅡ的可溶性表达。结果 Z-tTβRⅡ在16℃、18 h下，0.8 mmol/L IPTG时，诱导后全菌表达约22%和诱导后上清表达约13%;Z-tTβRⅡ在20℃、20 h下，诱导后全菌0.8 mmol/L IPTG时表达约23%,诱导后上清0.2 mmol/L IPTG时表达约14%;Z-tTβRⅡ在37℃、6 h下，0.2 mmol/L IPTG时，诱导后全菌约30%和诱导后上清约20%。结论 Z-tTβRⅡ蛋白最佳表达条件为37℃、6 h、IPTG浓度为0.2 mmo/L。

• 单位
  牡丹江医学院