基于CRISPR/Cas蛋白的副溶血弧菌检测方法的研究

作者：王群; 李哲; 赵林; 王紫鉴; 赵宏群; 阚飙^*; 逄波^*

来源：疾病监测, 2020, 35(06): 513-517.

• 规律间隔性成簇短回文重复序列
• Cas12a
• 副溶血弧菌
• 分子检测

目的利用规律间隔性成簇短回文重复序列(CRISPR)免疫原理及Cas12a酶的特点构建一种快速检测副溶血弧菌(VP)的方法,实现对病原菌准确快速的检测和识别。方法本研究通过制备纯化Cas12a蛋白,筛选构建VP的g RNA,建立CRISPR-VP荧光检测系统,根据最终荧光扩增曲线判定CRISPR-VP检测方法的有效性。结果在CRISPR-VP检测方法中只在VP的序列存在时才会产生明显的荧光信号。结论本实验初步建立了基于CRISPR/Cas蛋白的VP的检测方法,为后续简易检测试剂的研制提供理论依据。

• 单位
  传染病预防控制国家重点实验室; 上海交通大学医学院附属仁济医院; 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所