摘要
目的:从人前列腺癌细胞系中扩增获得目的基因前列腺干细胞抗原(PSCA),构建真核表达载体并进行真核表达。方法:从人前列腺癌细胞系LNCaP中扩增目的基因PSCA,构建真核表达质粒pIRES-neo-PSCA-His,脂质体法转染小鼠黑色素瘤B16细胞,用RT-PCR及免疫荧光和流式细胞仪分别检测B16细胞中人PSCA基因的mRNA和蛋白表达。结果:得到372 bp人PSCA目的基因片段,序列测定证实与GenBank上登录的序列一致。结论:成功构建pIRES-neo-PSCA-His质粒并验证其真核表达,为PSCA在前列腺癌免疫治疗研究中的应用奠定了基础。
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单位中国人民解放军总医院; 军事医学科学院基础医学研究所