内吞型EpCAM纳米抗体的筛选及鉴定

作者：先宗树; 李光辉; 盖军伟; 朱敏; 马琳琳; 鞠佃文^*; 万亚坤^*

来源：药学学报, 2020, 55(10): 2405-2413.

DOI：10.16438/j.0513-4870.2020-1359

• 上皮细胞黏附分子
• 纳米抗体
• 噬菌体展示技术
• 免疫文库
• 内吞

上皮细胞黏附分子(epithelial cell adhesion molecule, EpCAM)是肿瘤靶向治疗的热门靶点,本研究开发了3株高特异性针对EpCAM的胞吞型纳米抗体,为基于此靶点的免疫毒素研究提供基础。研究前期对骆驼免疫EpCAM-Fc蛋白,构建了高质量的噬菌体展示纳米抗体文库,运用噬菌体展示技术通过3轮淘选成功获得了17株互补决定区(complementarity determining region, CDR) 3序列不同的EpCAM纳米抗体,原核纯化获得高纯度的抗体蛋白后,流式细胞术确定其中7株具有细胞水平高结合活性。动物实验经复旦大学药学院实验动物伦理委员会(IACUC)批准。通过流式细胞术和激光共聚焦显微术最终鉴定出3株具有较高胞吞活性的EpCAM纳米抗体,且ForteBio测定具高亲和力。本研究以期为EpCAM阳性肿瘤的靶向治疗开辟新的途径,并为其他靶点的纳米抗体免疫毒素研究提供指导。

• 单位
  上海健康医学院