摘要

目的探讨circNT5E对结肠癌细胞迁移、侵袭和凋亡的影响及分子机制。方法选取40例2017年1月至2019年5月本院结肠癌患者癌组织及其相应癌旁组织;将结肠癌细胞HCT116分为si-NC组、si-circNT5E组、pcDNA组、pcDNA-circNT5E组、miR-NC组、miR-506-3p组、si-circNT5E+antimiR-NC组、si-circNT5E+anti-miR-506-3p组。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测circNT5E和miR-506-3p的表达水平;显色原位杂交(CISH)检测癌组织中circNT5E表达;Transwell检测细胞迁移和侵袭;流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白质印迹(Western blot)法检测基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达;双荧光素酶报告实验验证circNT5E和miR-506-3p的靶向关系。结果与癌旁组织相比,结肠癌组织中circNT5E表达水平显著升高,miR-506-3p表达水平显著降低(P<0.05)。沉默circNT5E或过表达miR-506-3p,迁移、侵袭细胞数显著降低,细胞凋亡率显著升高,MMP-2、MMP-9、Bcl-2表达水平显著降低,Bax表达水平显著升高(P<0.05)。circNT5E靶向调控miR-506-3p,抑制miR-506-3p表达逆转了沉默circNT5E表达对结肠癌HCT116细胞迁移、侵袭和凋亡的作用。结论沉默circNT5E表达可能通过上调miR-506-3p的表达抑制结肠癌HCT116细胞迁移、侵袭,促进细胞凋亡。

  • 单位
    西安交通大学第一附属医院