大肠杆菌中高效表达rhBMP-4的探讨及初步活性测定

作者：高思红; 汪炬; 董群伟; 刘侃; 刘雪婷; 洪岸; 谢秋玲; 孙奋勇

来源：中国生物工程杂志, 2006, (03): 51-56.

DOI：10.3969/j.issn.1671-8135.2006.03.011

• rhBMP-4
• 定点突变
• 包涵体
• 活性

目的:在大肠杆菌中表达具有生物活性的rhBMPBMP4。方法:在不改变氨基酸序列的前提下,以全基因合成的方式对人BMP4成熟肽基因全长进行定点突变,将之重组入pET3c表达载体并转化至大肠杆菌BL21(DE)plysS。IPTG诱导和包涵体复性后,利用C2C12细胞横向成骨细胞分化实验以及小鼠肌袋异位骨形成实验检测其活性。结果:获得0.348kb的BMP4DNA序列,表达的目的蛋白主要以包涵体的形式存在。经纯化及复性后,体内与体外的活性检测表明rhBMP4有良好的诱骨生成活性。结论:该方案能够实现rhBMP4在大肠杆菌中的高效表达。

• 单位
  暨南大学; 广东药学院附属第一医院