摘要
目的通过体外实验探索上调miRNA-204表达对卵巢癌细胞株SKOV-3增殖、凋亡的影响,阐明miR-204在卵巢癌中的作用机制。方法采用Mimics转染的方法,构建过表达miR-204的SKOV-3细胞株和空载对照组细胞株,实验共分为三组:正常对照组、过表达组和空白载体组,采用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测各组细胞miRNA-204表达水平的变化。采用CCK-8实验和流式细胞仪分别检测各组细胞的增殖和凋亡情况。通过Targetscan靶基因预测网站,筛选Bcl-2作为miR-204的靶向蛋白,采用蛋白印迹法(Western Blot)和双荧光素酶靶标实验验证。采用ANOVA和S-N-K检验分析三组及两两间统计学差异。结果与正常对照组相比,过表达组细胞miRNA-204的表达显著增加(P<0.01),细胞存活率显著降低(P<0.05),相对荧光强度明显降低(P<0.01),Bcl-2的蛋白表达水平显著下降(P<0.01);过表达组与空白载体组差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 miR-204高表达能明显抑制卵巢癌细胞的生长增殖、诱导凋亡,其可能的机制与Bcl-2参与促进细胞生长增殖、诱导细胞凋亡相关。
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