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摘要
类钙调蛋白 CML是一种包含EF-hand的钙结合蛋白，在植物协调抗逆性方面具有重要作用。为了探究葡萄CML基因在高温胁迫应答中的作用机制，本研究利用 RT-qPCR 方法验证葡萄叶片在高温胁迫下的转录组测序结果，从中筛选到一个高温诱导表达基因CML31。通过生物信息学分析表明该基因的CDS全长423 bp，编码含4个 EF-hand 的类钙调蛋白。通过烟草瞬时转化检测发现CML31蛋白定位于细胞核和细胞膜；利用同源重组法构建4个包含不同 EF-hand的诱饵载体，以pGBKT7-CML31Δ3为诱饵从葡萄 cDNA文库中筛选到5个互作蛋白，分别为葡萄丝裂原活化蛋白激酶激酶激酶1(MAPKKK1)、甲酸脱氢酶(FDH)、氰酸酯水合酶(CYN)、铁硫簇组装蛋白1(ISU1)和1个假定蛋白。本研究为揭示类钙调蛋白在葡萄高温胁迫响应中的作用与机制提供一定的参考。
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